כיצד לקבוע גנוטיפ?
התכונות המיוצגות בגנוטיפ יכולות להיות דומיננטיות או רצסיביות, ותקבענה כיצד תכונה זו באה לידי ביטוי על ידי האורגניזם.
ה- DNA מקודד את כל התכונות שיש לכל אורגניזם אחד. שילובים מסוימים של נוקלאוטידים של DNA ייצרו גנוטיפים שונים, או זוגות של תכונות. התכונות המיוצגות בגנוטיפ יכולות להיות דומיננטיות או רצסיביות, ותקבענה כיצד תכונה זו באה לידי ביטוי על ידי האורגניזם. כדי לקבוע גנוטיפ, אתה יכול להשתמש בריבוע Punnett. אם אתה עובד במעבדה מתקדמת יותר, אתה יכול להשתמש בשיטות אנליטיות כגון ניתוח PCR והכלאה של חומצות גרעין כדי לקבוע אילו גנוטיפים קיימים.
שיטה 1 מתוך 3: עובד ריבועי פונטה
- 1צייר ריבוע 2x2. ריבוע פונט משמש לקביעת הסבירות לגנוטיפ של צאצא בהתבסס על גנוטיפים של הוריו. הריבוע יתויג עם הגנוטיפ של כל הורה. בתוך הכיכר יוצגו הגנוטיפים האפשריים של הצאצאים.
- 2תייג את הצד השמאלי. קח את הגנוטיפ של אחד ההורים ופצל את שתי האותיות (המייצגות תכונות דומיננטיות ורססיביות). מקם אות אחת משמאל לשורה העליונה ואות אחת משמאל לשורה התחתונה. זה ייצג את תרומתו של אותו הורה לגנוטיפ של הצאצאים.
- נהוג לשים תכונה דומיננטית (אות גדולה) בשורה העליונה ותכונה רצסיבית (אות קטנה) בתחתית אם שתי התכונות שונות.
- 3תייג את החלק העליון. יש לפצל את תכונותיו של ההורה השני באותו אופן. הפעם, הניחו אות אחת מעל העמודה השמאלית, והשנייה מעל העמודה הימנית. זה ייצג את תרומתו של ההורה השני לגנוטיפ הצאצא.
- נהוג לשים תכונה דומיננטית (אות גדולה) משמאל ותכונה רצסיבית (אות קטנה) בצד ימין אם שתי התכונות שונות.
כדי לקבוע גנוטיפ, אתה יכול להשתמש בריבוע Punnett. - 4הזן מידע ידוע. כעת ניתן למלא כל ריבוע. בתוך כל ריבוע, כתוב את האות המתאימה לשורה בה נמצאת הריבוע. לאחר מכן כתוב את האות המתאימה לעמודה בה נמצאת הריבוע. זה יזהה את כל הגנוטיפים האפשריים עבור הצאצאים וכן את האחוז בו הם היה מתרחש.
- לתכונות מעורבות, כתוב את הגנוטיפ כך שהתכונה הדומיננטית תופיע קודם (Rr במקום rR).
שיטה 2 מתוך 3: רצף עם pcr
- 1בחר פריימר. פריימר הוא מולקולה הנקשרת לרצף מסוים של DNA. לאחר הכריכה, ניתן לאתר את הקלסר כדי לקבוע אם הרצף הזה היה קיים במדגם. זה מאפשר לבדוק רצפים ספציפיים המתאימים לגנוטיפ מסוים.
- 2אסוף דגימת DNA. לאחר שבחרת פריימר הנקשר לרצף המדובר, תצטרך לחלץ DNA מהתא. פעל לפי פרוטוקול החילוץ המתאים למעבדה שלך. לאחר שאספת דגימה, תוכל לבדוק אותה.
- 3הוסף את הפריימר למדגם. הוסף את פריימר לדגימת ה- DNA. אם קיים הרצף המתאים לאותו פריימר, הוא ייקשר למולקולה. לאחר השלמת זה, תוכלו לעבור לניתוח.
- 4ניתוח התוצאות. במקרים פשוטים, התוצאות פשוט חוזרות כחיוביות או שליליות על סמך אם הפריימר היה קשור לחוטי ה- DNA או לא. כמה שיטות מורכבות יותר עשויות לדרוש הליכים לאחר PCR. נהלים אלה יכולים להיות ארוכים ויקרים, ונמנעים במידת האפשר.
נוכחותו של הגשוש מעידה כי קיים הרצף המתאים לגנוטיפ המדובר.
שיטה 3 מתוך 3: שימוש בהכלאה של חומצות גרעין
- 1לעכל דגימת DNA. עיכול DNA הוא תהליך המפרק את שני גדילי ה- DNA. זה משאיר כל גדיל ללא זוג הבסיס המשלים שלו. פתח זה מאפשר ל- DNA להיקשר עם קווצות משלימות אחרות.
- 2הפרד שברים באמצעות אלקטרופורזה. אלקטרופורזה היא תהליך המשתמש בזרם חשמלי להובלת מולקולות דרך ג'ל. במקרה זה, עליך להשתמש בג'ל אגרוזה. ה- DNA ינוע לקראת הקצה החיובי של הג'ל ויופרד לפי גודל.
- 3מעבירים לנייר ניילון או ניטרוצלולוזה. לאחר הפרדת הגדילים, יש להעבירם מהג'ל. השתמש בהליך העברה דרומי להעברת הדגימה לגיליון נייר ניילון או ניטרוצלולוזה. מדיומים אלה מתאימים יותר להוספת החללית.
- 4הוסף בדיקה. בדיקות הן גדילי DNA המחמיאים לחוטים המדוברים. אם נמצא הגדיל המייצג גנוטיפ ספציפי, הוא יחייב את החללית. החללית מכילה גם מולקולת פלואורסצנט שניתן יהיה לזהות אותה במהלך הניתוח.
- 5שוטפים את הנייר. לאחר שתאפשר מספיק זמן להיקשר לחלונית לכל דגימה, עליך לשטוף את הנייר. עקוב אחר ההליכים הספציפיים למעבדה שלך, אך לרוב זה כולל שטיפה קלה של הנייר במים. היזהר שלא לזהם או לפגוע בדגימה במהלך הכביסה.
ריבוע פונט משמש לקביעת הסבירות לגנוטיפ של צאצא בהתבסס על גנוטיפים של הוריו. - 6חשוף את הנייר. לאחר שטיפת הדגימה תוכלו לבחון אותה. חשיפת הדגימה לאור אולטרה סגול תלהיב את הקמח המצורף לחלש. זה ייצור תמונה עם אזורי אור עז יחסית לרקע. אם אין בדיקה נוכחת, לא יהיו אזורים מוארים.
- נוכחותו של הגשוש מעידה כי קיים הרצף המתאים לגנוטיפ המדובר.
- פרויקט הגנום האנושי יש תהליכים מפותחים עבור רצפי DNA ישירות. תהליכים אלה מאפשרים קביעה בקנה מידה גדול של גנוטיפים.
קרא גם: כיצד לבדוק שיעורי בית במתמטיקה?
